定向进化将热稳定家族A DNA聚合酶改造为可逆转录2'-修饰RNA的逆转录酶

研究团队采用微流控分区自复制（CSR）定向进化方法改造Thermus thermophilus DNA聚合酶，获得可逆转录C2'-修饰RNA的工程化变体E5，该活性此前对该酶不可及。通过九轮进化结合NGS、统计方法、蛋白质语言模型与晶体学数据，研究揭示了控制聚合酶功能的未知上位性网络，数据集涵盖超过196,000个热稳定酶变体。